Микроскопическое и бактериологическое исследование желчи. Микроскопическое исследование жёлчи
Микроскопическое исследование желчи проводят непосредственно после её получения, так как клеточные элементы в желчи быстро разрушаются под действием желчных кислот и мыл.
Для микроскопического исследования берут желчь без примеси желудочного и кишечного соков (обычно исследуют порции В и С). Желчь выливают на чашки Петри, отсасывают клочки слизи и помещают их на предметное стекло, готовя из них несколько препаратов. Остальную желчь центрифугируют и из осадка также готовят нативные препараты. Общее количество препаратов должно быть не менее десяти.
Большее диагностическое значение имеет выявление эпителиальных клеток , но только в тех случаях, когда эпителий достаточно сохранился для того, чтобы можно было идентифицировать его происхождение: для холециститов характерно выявление высоких призматических реснитчатых клеток, для холангитов - мелких призматических клеток печеночных ходов или высоких призматических эпителиальных клеток общего желчного протока, для патологических процессов в двенадцатиперстной кишке - крупных цилиндрических клеток с кутикулой и ворсинками.
Кристаллы холестерина можно обнаружить в желчи здоровых людей. Они имеют вид тонких бесцветных четырехугольных пластинок с обломанным углом. Увеличение кристаллов холестерина указывает на изменение коллоидной стабильности желчи.
Микролиты - темноватые, крупные или многогранные образования, состоящие из солей кальция , слизи и небольшого количества холестерина. В норме микролиты не встречаются; их обнаружение в желчи, как правило, свидетельствует о нарушении коллоидной стабильности желчи. Нередко при этом патологическом процессе обнаруживают еще более мелкие (микроскопические) крупинки различной величины и цвета, которые принято обозначать как «песок».
Кальция билирубинат представляет собой аморфные мелкие крупинки золотисто-желтого или коричневатого цвета. Нередко они обнаруживаются в желчи в сочетании с большим количеством кристаллов холестерина. Кристаллы жирных кислот имеют вид тонких игл. Их появление свидетельствует о снижении растворимости жирных кислот, обусловленном воспалительным процессом, и о нарушении коллоидной стабильности желчи.
Паразиты . В дуоденальном содержимом могут быть обнаружены как вегетативные формы некоторых паразитов (чаще всего
Инна Лавренко
Время на чтение: 4 минуты
А А
Клиническая медицина опровергает наименование билирубиновых желчных камней. Конкременты в билиарной системе могут быть или холестериновыми, или пигментными. Кальциевый билирубинат присутствует в том или ином количестве в любом из образований. Преобладающее вещество дает название образованным структура, при этом пациенты остро интересуются, что нужно делать, если обнаружили билирубиновые камни в желчном пузыре.
Особенностью пигментных камней, которые называют билирубиновыми, является их нерастворимость. Он очень твердые, немного не дотягивают по показателям прочности граниту. Растворение возможно только для холестериновых образований, при этом учитывается размер до 10…20 мм. Также необходимо обеспечить пустоту в органе на две трети его полости, стенки должны нормально сокращаться. Лечение каждого из видов образований проводится исходя из типа вещества в его основе.
Практически во все конкременты входит некоторое количество билирубината кальция. Образования между собой различаются показателями полимеризации основного вещества, его веса и состава ядра. Камни из холестерина растворяются очень хорошо и встречаются чаще прочих. Наиболее уязвимы к таким образованиям беременные женщины.
Холестериновые конкременты
При камнях этого типа в составе выявляют соли минералов, фосфаты или карбонат, пальмитаты, а также муцин и кальциевый билирубинат. В редких случаях может обнаружиться камень из одного холестерина. Как правило, все желчные формирования многокомпонентны и называются смешанными. Есть ряд факторов, провоцирующих образования холестеринового типа или смешанного. Это принадлежность к женскому полу, отсутствие здорового питания, наличие ожирения или стремительного похудения, пожилой возраст, беременность.
Камни из холестерина довольно крупные и слоистые, их можно легко раскрошить. Светлый цвет и форма ягоды ежевики позволяет дифференцировать природу конкремента на снимках УЗИ. Если к формированию добавляется муцин, то вид становится смешанным.
Эти образования находят у четверти больных с каменной болезнью. Пигментную основу от холестериновой отличает отсутствие в составе холестериновых вкраплений. В результатах анализов пациента присутствуют высокие показатели билирубина, до 40 единиц. При образвоания в желчном пузыре пигментной структуры эти конкременты называют билирубиновыми желчными камнями.
Виды желчных камней
Около четверти всех выявленных случаев относят к условиям жизни, региону, климату, экологической обстановке и другим факторами. Билирубин после удаления желчного пузыря может быть повышенным, что укажет на формирование конкрементов в холедохе или печеночных протоках. Хотя официально название билирубиновых структур не закреплено, отсутствие в их составе холестерина позволяет негласно называть их именно так. Генезис пигментного типа содержит две группы, черные и коричневые разновидности.
Черные
Черные конкременты не имеют в своем составе холестерина, а в остальном идентичны по своему составу. Основное вещество, которое связывает все компоненты, это кальция билирубинат. Формируются такие образования в желчном пузыре, очень редко переходят в протоки. Опасными считаются состояния гемолиза крови, когда в желчном секрете содержится повышенный билирубин несвязанного типа, изменения кислотно-щелочного баланса среды, пожилой возраст или наличие цирроза печени любой этиологии, а также при питании без участия пищевода и полости рта. Эти камни образуются из полимерных соединений меди и не отличаются четкими контурами или сформированной структурой.
Коричневые
Отличием коричневых конкрементов от черных является присутствие кальциевых солей без связки с билирубинатом, который меньше полимеризуется. Остальной состав образования занят холестерином. Формирование коричневых камней происходит при ферментном обмене, который осуществляется флорой патогенной характера. Причиной подобного процесса становится поражение бактериями или микроорганизмами. Этот вид чаще обнаруживается в желчевыводящих протоках, нежели в пузыре.
Почему формируются конкременты в билиарной системе?
Для каждого образования есть своя причина, по которой он формируется, увеличивается и начинает движение. Из причин выделяют внешние факторы и внутренние состояния, спровоцировавшие камнеобразование. Для пациента важна квалификация врача, который должен определить первопричину формирования конкрементов. Если допустить ошибку на этом этапе, с течением времени может появиться рецидив и понадобится проведение холецистэктомии, манипуляции, когда хирурги выполняют удаление желчного пузыря.
Холестериновые образования возникают у пациента, если присутствует высокий уровень этого вещества в крови, а также есть белковая слизь, иначе, муцин. Также влияет показатель кальция в плазме крови, в таком случае диагностируется гиперкальциемия. В группе риска находятся пациента с недостаточным количеством вырабатываемых желчных кислот или плохой сокращаемостью стенок в желчном накопителе.
В составе желчи есть фосфолипиды, которые занимают примерно пятую часть от общего числа. Вместе с холестерином они формируют ядро, на которое налипает муцин и кальциевые соли. В правильно работающем организме происходит связка холестерина с желчными кислотами и лецитином, вследствие чего формируется мицеллы. Связь нарушается в полости двенадцатиперстной кишки. За повышение холестерина отвечает печень, которая выделяет его из кровотока. Также это вещество формируется в кишечном тракте и кожном эпителии.
Химический процесс повышения холестерина
Очистка крови от избытка холестерина производится печенью. Все отработанные вещества покидают организм через кишечный тракт вместе с каловыми массами. Если вырабатывается слишком много холестерина, то причина кроется в рецепторах печеночных клеток и мембранах гепатоцитов. Это может быть и наследственным фактором.
Фосфолипиды связывают желчные соли и холестерин в качестве везикул, что позволяет не повреждать поверхности внутри жёлчных протоков. Но если не хватает желчной кислоты, то добавляются в состав минералы. Это происходит при низком уровне синтеза кислоты в печени или при их реабсорбции в кишечном тракте. В норме избыток холестерина распределяется равномерно между везикулами и мицеллами.
Муцин, находящийся на стенках желчного накопителя, цепляет к себе везикулы и кристаллы холестерина, которые не связаны. Образования начинают затвердевать и являются конкрементами в начальной стадии развития. Постепенно в структуру добавляются соли кальция и нарушается сократительная функция стенок билиарного накопителя. Внутри содержимое органа обновляется и перемешивается очень тяжело, появляются застои. Везикулы в разы уплотняются и растут, а кислоты, которые синтезируются печеночной системой, мешают выпадению осадка только при окислении ионами водорода. Этот процесс возможен из-за абсорбции воды, что происходит активнее всего именно в желчном пузыре.
Пигментных
Конкремент пигментного типа считается самым опасным, поскольку остальные растворяются, а этот лечится только хирургически. Можно убедиться в этом на осмотре у терапевта, поскольку бытует мнение, что литотрипсия позволяет удалить и пигментные образования. Черные структуры часто бывают в пузыре при сопутствующих патологиях – гемолизе, циррозе или любой форме панкреатита. Всегда формирование проходит при повышенном уровне билирубина, который представляет собой яд.
Этот токсин связывается с глюкоуроновыми кислотами в клетках печени, но при гемолизе поступление билирубина повышается в несколько раз, а печень не успевает отработать такое количество. В таком случае желчный пузырь наполняется билирубиновым моноглюкоуронидом, который является основой для конкремента.
Кишечным трактом выполняется реабсорбция желчи, что усугубляет ситуацию. Кислотно-щелочной баланс в органе растет, полость заполняется карбонатом и фосфатами. При этом моторика в стенках не меняется. Процесс формировани билирубиновых (пигментных) камней не изучен до конца, он очень сложен, но в целом считается, что инфекция цистоскелетами и слизью разрывает связь билирубина и желчной кислоты. Высвобождаемые тауриновые и глициновые кислоты, пальмитиновые и стеариновые их виды связывают ионы кальция с осадком, связывают эти молекулы и формируют кристаллы будущих камней.
Если билиарный орган поражен камнями настолько, что требуется операция, можно попробовать литотрипсию. Этот ударно-волновой способ изобретен в Германии в 1980-хх годах. Суть манипуляции заключается в воздействии рефлектором с акустическими волнами на конкретную зону. У этого аппарат есть функция рентгена, что позволяет специалисту и больному наблюдать происходящее внутри. На первом этапе дается небольшая мощность, но как только происходит фокусировка на камне, воздействие растет. Первоначально этот способ действовал для почек, но позже стали растворять образования и в билиарной системе.
При этом у больного не должно быть осложнений желчно-каменного заболевания, камни должны быть в диаметре до 2 сантиметров, и числом менее трех. Мелкие конкременты (песок) в расчет не берут. Наиболее успешна операция при единичном образовании. Врач перед началом процедуры должен убедиться, что ядро камня холестериновое, а отложение всех солей происходит только по периферии. Пациент проходит обследования, в ходе которых определяется сократительная функция стенок билиарного органа.
Заключение
Клиническая медицина имеет несколько способов растворить камни и избежать операции. Но билирубиновые камни специалисты даже не пробуют удалять. Все чаще стали делать лазерную литотрипсию, которая в желчной системе используется довольно часто, но только для холестериновых отложений. Риски дробления смешанных конкрементов слишком высоки, поскольку фрагменты могут повредить слизистые, забить просвет в протоках, вызвать перфорацию стенок и множество других печальных последствий. Таким образом, пигментные камни из билирубина растворить не удастся.
Микроскопическому исследованию должны быть подвергнуты все порции желчи, содержащие взвешенные хлопья слизи и/или осадок на дне пробирок. При этом необходимо учитывать, что протеолитический фермент поджелудочной железы трипсин находится в активном состоянии и быстро расщепляет клеточные элементы. Микроскопическое исследование желчи необходимо проводить немедленно, по мере получения очередной пробирки (фракции), так как уже через несколько минут клеточные элементы двенадцатиперстной кишки и желчевыводящей системы, заключенные в рыхлую слизь, будут частично или полностью лизированы. Долго сохраняются в дуоденальном содержимом клеточные элементы дыхательных путей (носовая слизь, мокрота), заключенные в густую и плотную слизь. При длительном стоянии in vitro нарушается коллоидная стабильность полученной желчи, из раствора выпадают кристаллы желчных кислот или холестерина, а билирубин окисляется до биливердина, что сопровождается позеленением желчи.
Методика приготовления препаратов
Содержимое пробирки выливают в чашку Петри, поставленную на черный лист бумаги.
Пипеткой последовательно извлекают взвешенные хлопья слизи, составляют из них нативный препарат и накрывают покровным стеклом. Из осадка, образовавшегося на дне пробирки, нужно приготовить отдельный препарат.
Слизь, обнаруженная в той или иной фракции дуоденального содержимого, может относиться не только к пораженной воспалительным процессом желчевыводящей системе (внутри- и внепеченочным желчным протокам, желчному пузырю, общему желчному проходу). Во время дуоденального зондирования одноканальным тонким зондом в двенадцатиперстную кишку попадают слюна, носовая слизь, мокрота, желудочная слизь. Следовательно, лейкоциты, обнаруженные в слизи дуоденального содержимого, могут не свидетельствовать о воспалении двенадцатиперстной кишки и желчевыводящей системы. Происхождение лейкоцитов помогают установить обнаруженные клетки эпителия и другие элементы.
Слизь из дыхательных путей пропитана пузырьками воздуха, поэтому она всегда находится на поверхности пробирки с дуоденальным содержимым.
Эту слизь перед микроскопией необходимо удалить с помощью пипетки.
Если элементы слизи попали в приготовленные для микроскопии препараты, следует учитывать следующие признаки:
лейкоциты слюны и носовой слизи расположены на фоне плоского эпителия и большого количества бактерий;
лейкоциты мокроты расположены на фоне реснитчатого эпителия, альвеолярных макрофагов и миелина;
лейкоциты желудочной слизи представлены голыми сегментированными ядрами на фоне эпителия в виде одинаковых по размеру мелких овальных голых ядер (не относящиеся к желчевыводящей системе и двенадцатиперстной кишке лейкоциты в бланк-ответ не вносить!);
окрашенные желчью свободно лежащие лейкоциты диагностического значения не имеют;
мертвые лейкоциты из любого очага воспаления, попавшие в желчь, сразу окрашиваются желчью в желтый или темно-желтый цвет;
лейкоциты, находящиеся в состоянии парабиоза, не окрашиваются.
Патология
При воспалении внутрипеченочных ходов (холангите, холангиогепатите) лейкоциты сочетаются с низким призматигеским эпителием, выстилающим внутрипеченочные ходы.
Этот эпителий имеет высоту 15-18 мкм, ядра расположены близко к основанию клеток. Однако если в слизи данной порции обнаруживают в большом количестве только низкий цилиндрический эпителий, диагноз холангита или холангиогепатита не исключается, так как лейкоциты обычно разрушаются непосредственно во внутрипеченочных желчных ходах.
Низкий призматигеский эпителий обнаруживают при холангите или холангио-гепатите в хлопьях слизи пегеногной желги (порции желчь «С»). При холедохите (воспалении общего желчного протока) лейкоциты сочетаются со «спигегным» эпителием, выстилающим общий желчный проток (длинным и узким цилиндрическим эпителием высотой до 40-50 и шириной 5-6 мкм). При холедохите лейкоциты со «спигегным» эпителием обнаруживают в хлопьях слизи во всех фракциях порций желчи «А», «В» и «С» или представлены мелкозернистой массой в результате их распада. Большое количество этого эпителия, покрывающее все поле зрения, даже без сочетания с лейкоцитами позволяет поставить или подтвердить диагноз холедохита.
При холецистите цилиндригеский эпителий, выстилающий желчный пузырь, в порции желчи «В» обнаружить практически не удается, так как отторгнутый при воспалении цилиндрический эпителий желчного пузыря и лейкоциты разрушаются in vivo непосредственно в желчном пузыре и в порции желчи «В».
При холецистите во время операции лейкоциты обнаруживают не в просвете, а непосредственно в воспаленной стенке желчного пузыря, что подтверждается при микроскопии желчи, полученной при пункции желчного пузыря перед его удалением. О холецистите при дуоденальном зондировании можно судить по темно-зеленой или зеленоватой окраске только что полученной пузырной порции желчи.
Лейкоциты при воспалении двенадцатиперстной кишки, дуодените расположены на фоне цилиндригеского кутикулярного эпителия. На свободной, обращен¬ной в полость двенадцатиперстной кишки поверхности этого эпителия имеется довольно толстая кутикула, образующая исчерченную кайму, хорошо различимую в нативных препаратах. Кутикула состоит из сети тонких перекладин, между которыми находятся узкие канальцы. Через эти канальцы происходит всасывание. Цилиндрический кутикулярный эпителий имеет высоту 45-52 мкм, ширину в апикальной части 12-16 мкм, крупные ядра овальной формы, веретенообразно выдавливающие нижнюю часть клеток.
При дуодените в слизи всех фракций дуоденального содержимого обнаруживают скопления и большие пласты кутикулярного эпителия в виде палисада или пчели¬ных сот. Эпителий двенадцатиперстной кишки постоянно травмируется кислым содержимым желудка, поэтому в норме он полностью обновляется в течение 2 сут.
Главные критерии принадлежности лейкоцитов желчи - условия и фон их обнаружения. Лейкоциты из желчных протоков и двенадцатиперстной кишки обнаруживают в слизи на фоне цилиндрического эпителия соответствующего участка. Они обычно бесцветные или слегка желтоватые, зернистые, быстро под-вергаются протеолизу. У больных с явной патологией желчевыводящей системы приходится долго и упорно искать лейкоциты на фоне эпителия общего желчного протока и эпителия мелких внутрипеченочных желчных протоков. Чаще обнаруживают только слизь, содержащую мелкозернистую массу, расположенную в виде мелких зернистых пятен, отдаленно напоминающих контуры цилиндрического эпителия и лейкоцитов. Такие препараты получают из фракций, несвоевременно подготовленных для микроскопии. При холангите и холецистите септического характера и застое желчи лейкоциты и эпителий общего желчного протока и желчного пузыря могут покрывать в нативных препаратах все поля зрения.
В слизи дуоденального содержимого (порции желчи «А» и/или «С») обнаружи-вают круглые, достаточно крупные (до 18-22 мкм) клетки, получившие название лейкоцитоидов, представляющие собой округлившийся цилиндрический эпителий двенадцатиперстной кишки. В препаратах, окрашенных азур Н-эозином, в этих клетках хорошо определяются 3-4 фрагмента ядра, потерявшего специфическую структуру хроматина (кариорексис). Среди лейкоцитоидов можно обнаружить эозинофилы и лимфоциты. Если микроскопист принимает лейкоцитоиды за лейкоциты, это приводит к гипердиагностике воспалительных процессов в желчевыводящей системе и двенадцатиперстной кишке.
Часть лейкоцитоидов в быстрооттекающих порциях желчи «В» и «С» может быть пузырного происхождения. Выделение хлопьев слизи с лейкоцитоидами наблюдается как в норме, так и при патологии. Особенно большое количество лейкоцитоидов в дуоденальном содержимом наблюдается у молодых людей с повышенной нейрогуморальной раздражимостью.
Осадочные образования желчи
Содержание в желчи кристаллических и аморфных осадочных образований указывает на потерю ее коллоидной стабильности и позволяет заподозрить дискринию или наличие камней в желчных протоках.
Диагностическое значение имеют следующие осадочные образования:
микролиты;
билирубинат кальция;
кристаллы холестерина;
кристаллы жирных кислот;
кристаллы желчных кислот.
При большом количестве осадочных образований на дне пробирки образуется осадок, из которого необходимо приготовить нативный препарат. Для этого каплю осадка наносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом.
Микролиты - темноватые, преломляющие свет округлые или многогранные образования, их обнаруживают чаще в порции желчи «ВС», т. е. в желчи, поступающей в двенадцатиперстную кишку в конце пузырного рефлекса, но иногда и в порции желчи «А» у больных с клинически выраженной патологией желчевыводящих путей. В микролитах округлой формы (сферомикролитах) определяется концентрическая структура. В состав сферомикролитов входят слизь, известь и небольшое количество холестерина.
Кристаллы холестерина - бесцветные, прозрачные, прямоугольной формы пластинки, обычно с выемками в виде ступенек. Кристаллы холестерина раство-ряются в концентрированной серной кислоте с образованием соединений красного цвета. Кристаллы холестерина иногда встречаются в норме у практически здоровых людей, женщин - за 3-4 дня до начала менструального цикла, лихорадящих больных. Иногда холестерин выпадает в осадок в чистых порциях желчи при их длительном хранении.
При патологии желчевыводящих путей кристаллы холестерина в порции желчи «А» встречаются часто в большом количестве в виде осадка на дне пробирок или в хлопьях слизи, что объясняется временной потерей коллоидной стабильности желчи. Именно поэтому содержание большого количества кристаллов холесте¬рина в желчи не является прямым доказательством наличия желчных камней и свидетельствует только о высоком риске их образования. При этом целесообразно проведение профилактических мероприятий, направленных на предупреждение образования камней в желчевыводящих путях.
Билирубинат кальция - бурые, желтые или черные комочки, глыбки пигмента, встречаются в большом количестве в порции желчи «А» у пожилых людей, стра-дающих заболеваниями печени, продолжительным неполным застоем желчи и ее инфицированием (бактериохолией). Билирубинат кальция в отдельных хлопьях слизи, часто в сочетании с кристаллами холестерина и крупинками желчных кислот, служит основой для образования камней. Билирубинат кальция в норме не встречается.
Кристаллы желгных кислот - мелкие, блестящие, коричневатые, ярко-желтые или серые зернышки, часто покрывающие все поля зрения в слизи нативного пре-парата. Большое количество аморфных кристаллов свободных желчных кислот наблюдается в дуоденальной желчи (порции желчи «А») при примеси кислого желудочного сока. При этом дуоденальная желчь становится равномерно мутной, а на дне пробирки скапливается обильный осадок. Результаты исследования загрязненной желудочным соком желчи в бланк-ответ не вносятся.
Соли желчных кислот входят в состав желчных камней, поэтому обнаружение в незагрязненных фракциях порции желчи «А» при pH 7,0-7,5 и относительной плотности 1,010 г/л обильного осадка, состоящего из желчных кислот, свидетельствует о дискринии.
Кристаллы жирных кислот - длинные нежные иглы, часто сгруппированные в пучки. Если кристаллы жирных кислот обнаружены только в порции желчи «В», то, вероятно, это связано со снижением pH пузырной желчи за счет воспалительного процесса, а также уменьшением их растворимости в желчи. Жирные кислоты в больших количествах отщепляются от лецитина желчи под влиянием фермента - лецитиназы, активность которой увеличивается в присутствии солей дезоксихолевой кислоты, глутаминовой кислоты и бактерий. В анацидном желудочном соке содержится много жирных кислот, их в процессе дуоденального зондирования одноканальным зондом обнаруживают в порциях желчи «А», «В» и «С».
Исследование слизи играет важную роль при микроскопии дуоденального содержимого. В нативном препарате она может быть обнаружена в виде белой или желтой массы, комков, пленок или обрывков пленок. О происхождении слизи можно судить по обнаруженным в ней эпителиальным клеткам, относящимся к тому или иному отделу желчевыводящей системы или двенадцатиперстной кишки, а также кристаллам, микролитам и другим клеточным и неклеточным элементам, не относящимся к желчевыводящей системе.
Нормальная жёлчь не содержит клеточных элементов; иногда присутствует незначительное количество кристаллов ХС и билирубината кальция.
Слизь в виде мелких клочков свидетельствует о катаральном воспалении желчевыводящих путей, дуодените.
Эритроциты диагностического значения не имеют, так как они часто появляются в результате травмы при зондировании.
Лейкоциты. Диагностическое значение имеют лейкоциты, обнаруживаемые в мелких хлопьях слизи в сочетании с эпителием жёлчных ходов или жёлчного пузыря. Наличие лейкоцитов только в порции А наблюдают при дуоденитах и при воспалительных явлениях в крупных жёлчных протоках. Обнаружение лейкоцитов в основном в порции В, при меньшем их содержании в порциях А и С, указывает на локализацию воспалительного процесса в жёлчном пузыре. Преобладание лейкоцитов в порции С отмечают при холангитах. Значительное количество лейкоцитов во всех фракциях жёлчи наблюдают у ослабленных престарелых больных с септическим хо-лангитом и абсцессами печени. Эозинофильные лейкоциты обнаруживают при аллергических холециститах, холангитах и глистных инвазиях.
Эпителий. Высокий призматический реснитчатый эпителий характерен для холециститов, мелкие призматические клетки печёночных ходов или высокий призматический эпителий общего жёлчного протока - для хо-лангитов. Крупные цилиндрические клетки с кутикулой и ворсинками указывают на патологию в двенадцатиперстной кишке.
Клетки злокачественных новообразований можно выявить в содержимом двенадцатиперстной кишки при новообразованиях.
Кристаллы ХС. Их количество увеличивается при изменении коллоидной стабильности жёлчи (желчнокаменная болезнь). Они, как правило, накапливаются вместе с остальными кристаллическими элементами жёлчи, - микролитами, солями кальция (билирубинат кальция), кристаллами жирных и жёлчных кислот.
В норме все кристаллические элементы отсутствуют, их наличие свидетельствует о нарушении нормальных коллоидальных свойств жёлчи, то есть о патологическом процессе холелитиаза.
Обновлено: 2019-07-09 21:43:14
- Коклюш - заразная болезнь, которая характеризуется приступами судорожного кашля, иногда со рвотой. Болеют коклюшем преимущественно в детском возрасте
- Плохое зрение, как я уже говорил, является следствием аномального состояния психики. Очки могут иногда нейтрализовать воздействие этого состояния
- Почти во всех случаях нарушенного из-за аномалий рефракции зрения существует объект или объекты, которые могут рассматриваться с нормальным зрением.
Микроскопическое исследование многих (5-8) -порций полученного дуоденального содержимого необходимо проводить сразу же после их получения. Это обусловлено резко выраженными литическими свойствами желчи: эпителий и лейкоциты, окутанные рыхлой слизью, разрушаются желчью уже спустя 5-10 мин, нарушается коллоидная стабильность полученной желчи, в осадок выпадают желчные кислоты и даже холестерин.
Желчь из пробирки выливают в чашку Петри и рассматривают на белом и черном фоне. Пастеровской пипеткой с грушей вылавливают хлопья слизи, переносят их на предметное стекло, накрывают покровным и изучают под микроскопами (окуляр 10Х, объективы 20X и 40Х).
Материал для микроскопического исследования можно сохранять в течение 1 - 2 ч, добавив к полученной желчи, 1/3 объема 10 % нейтрального формалина. Консервирование эффективнее при добавлении к 10-20 мл полученной желчи 2 мл 10 % ЭДТА или 1 мл (1000 ЕД) контрикала (тзалола, или трасилола,).
Желчь, полученная даже через спиральный двухканальный зонд, представляет собой сложную, гетерогенную систему, состоящую из желудочного сока, дуоденального содержимого и непосредственно желчи. Хлопья слизи, обнаруженные в желчи, могут происходить из полости рта, носовой части глотки, легких, желудка и пищевода. Под влиянием ферментов клеточные элементы желчи быстро деформируются и разрушаются. На дно пробирки под влиянием соляной кислоты, секрета поджелудочной железы, бактерий из желчи могут выпадать кристаллические образования (желчные кислоты, жирные кислоты, холестерин), затрудняющие интерпретацию липолитических (липогенных) свойств исследуемой желчи.
Лейкоциты.
Лейкоцитарные клетки проглоченных экскретов дыхательных путей имеют более выраженную зернистость, рядом с ними находятся альвеолярные макрофаги и компактная слизь. Лейкоциты полости рта обычно располагаются на фоне неороговевающего многослойного плоского эпителия. Лейкоциты желудочного происхождения могут сочетаться с железистым эпителием. Желудочный сок у такого больного обычно соляной кислоты не содержит. Лейкоциты и. железистый эпителий, попавшие в желчь из кислого желудка, представлены голыми ядрами, лежащими на нежно-волокнистой слизи.
Возможно попадание в желчь лейкоцитов из пораженных воспалительным процессом протоков поджелудочной железы (каналикулярный панкреатит). При каналикулярном пакреатите протоки поджелудочной железы заполнены экссудатом и лейкоцитами. С учетом всей клинической картины при обнаружении в хлопьях слизи в дуоденальном содержимом лейкоцитов и цилиндрического эпителия можно предположить, что они попали в желчь из протоков поджелудочной железы.
Лейкоциты, обнаруженные в порции А (дуоденальная желчь), а также после введения магнезии сульфата в сочетании с высоким цилиндрическим кутикулярным эпителием указывают на наличие дуоденита.
Эпителий.
Цилиндрический (призматический) эпителий, выстилающий всю поверхность двенадцатиперстной кишки, имеет в зоне, обращенной в полость кишки, довольно толстую кутикулу (кожицу), хорошо различимую в нативном препарате. Кутикула состоит из сети тонких перекладин, между которыми расположены узкие канальцы, обусловливающие всасывание. Ядра эпителия двенадцатиперстной кишки большие, овальной формы, выдавливающие нижнюю часть клетки.
Начальным элементом желчевыделительной системы являются желчные капилляры, стенкн которых образуют мембраны печеночных клеток. Желчные капилляры в месте их соединения с печеночными пластинками (желчными ходами портальных полей) называются холангиолами. Они выстланы клетками кубического эпителия высотой 10-12 мкм с крупными круглыми ядрами.
Междольковые желчные проточки выстланы клетками цилиндрического эпителия высотой 15-18 мкм с круглыми ядрами, расположенными близко к основанию. Такие эпителиальные клетки различной величины часто обнаруживаются в сочетании с лейкоцитами в дуоденальной (А) и печеночной (С) желчи у больных холангитом.
При цитологическом исследовании, пузырной желчи иногда удается обнаружить клетки цилиндрического эпителия высотой 20-50 мкм. В нативных препаратах обычно хорошо выделяются большие круглые или овальные ядра, расположенные близко к основанию клеток; цитоплазма нередко вакуолизнрованная, у основания клеток заканчивается острым хвостовидным выростом - эпителий желчного пузыря.
Клетки слизистых желез желчного пузыря (бокаловидные) встречаются очень редко, но могут быть обнаружены в желчи, полученной во время операции из воспаленного желчного пузыря. Эти клетки особенно быстро подвергаются распаду.
Общий желчный проток выстлан высоким цилиндрическим эпителием, клетки которого резко отличаются от других подобных эпителиальных клеток. Это довольно длинные (до 37 мкм), очень узкие клетки со сжатыми и вытянутыми ядрами («спичечные клетки»). Наличие этих клеток в дуоденальной желчи в свободном виде и в сочетании с лейкоцитами указывает на воспаление общего желчного протока (холедохит).
Лейкоцитоиды
Лейкоцитоиды - круглые крупные клетки, больше лейкоцитов на 1/3. Представляют собой округлившиеся в результате дистрофии клетки цилиндрического эпителия двенадцатиперстной кишки. Появляются лейкоцитоиды при усиленном выделении пузырной желчи в двенадцатиперстную кишку. Большое количество лейкоцитов можно обнаружить в бесцветном дуоденальном содержимом при механической желтухе. Большое количество лейкоцитоидов отмечается у молодых людей с повышенной нейрогуморальной раздражимостью. В сочетании с цилиндрическим эпителием двенадцатиперстной кишки лейкоцитоиды могут наблюдаться при дуодените или язвенной болезни. Обычно для таких больных характерна высокая кислотность желудочного содержимого.
Элементы осадка
Обнаружение в дуоденальном содержимом кристаллических и аморфных осадочных образований желчи указывает на то, что она потеряла свою коллоидную стабильность. Причиной появления их может быть воспалительный процесс в желчных путях, нарушение коллоидной стабильности в результате длительного стояния или попадания в желчь желудочного содержимого.
Диагностическое значение имеют следующие кристаллические образования, обнаруживаемые в желчи: микролиты, кристаллы холестерина, желчные и жирные кислоты, билирубинат кальция и коричневые пленки желчного пузыря.
Микролиты
Микролиты - темноватые, округлые или многогранные компактные образования, иногда имеющие концентрическую исчерченность; состоят из извести, слизи и небольшого количества холестерина. Для обнаружения в желчи микролитов используется реакция Сальковского.
Методика. К покровному стеклу, под которым находятся исследуемые кристаллы или микролиты, подносят каплю концентрированной серной кислоты и опускают ее таким образом, чтобы она коснулась покровного стекла. С другой стороны покровного стекла прикладывают фильтровальную бумагу. При этом кислота достигает исследуемых кристаллов. При наличии в составе микролитов холестерина они, расплавляясь, дают розовое или красноватое окрашивание. Чистый холестерин, плавясь под действием серной кислоты, окрашивается в ярко-красный цвет. Микролиты чаще всего обнаруживаются в последней порции желчи (В) и порции остаточного сокращения желчного пузыря (ВС).
Холестерин.
Тонкие бесцветные четырехугольные пластинки, иногда с «обломанным» углом, которые, накладываясь друг на друга, как бы образуют ступеньки (рис. 87). Обнаружение их в желчи обычно связано с нарушением ее коллоидной стабильности вследствие несвоевременного исследования. В норме кристаллы холестерина встречаются в скудном количестве. При патологии желчных путей процент обнаружения кристаллов холестерина значительно выше, а количество их больше.
Билирубинат кальция
Билирубинат кальция представляет собой аморфные крупинки бурого, черного, коричневого или золотисто-желтого пигмента. Часто встречается в сочетании с кристаллами холестерина в порции желчи А, при задержке ее в общем желчном протоке - и в порции ВС. Кристаллы билирубината кальция у здоровых людей не выявляются, они обнаруживаются лишь в желчи пожилых людей, страдающих продолжительным, неполным застоем желчи и ее инфицированием.
Кристаллы жирных кислот.
Нежные тонкие бесцветные иглы, превращающиеся при подогревании нативного препарата на пламени спиртовки в капли, имеют диагностическое значение только при исключении попадания в желчь желудочного содержимого. Указывают на снижение pH желчи вследствие воспалительного процесса, бактериохолии, дискринии и на понижение растворимости жирных кислот. Обнаруживаются в тех же порциях желчи и при той же патологии желчных путей, что и кристаллы холестерина и билирубината кальция.
Желчные кислоты.
Мелкие блестящие коричневато-желтые или серые зернышки. Чаще всего выпадают в осадок в большом количестве при попадании в желчь кислого желудочного содержимого. Крупинки желчных кислот иногда обнаруживаются в пузырной желчи, собранной перед холецистэктомией. Соли желчных кислот могут входить в состав желчных камней. Обнаружение в чистых порциях дуоденальной желчи кристаллов желчных кислот в виде осадка или в слизи указывает на дискринию.
Коричневые пленки.
Представляют собой отложение слизи и желчи на внутренней поверхности желчного пузыря. Под микроскопом напоминают мелкие осколки разбитого фарфорового сосуда. Встречаются в пузырной желчи у больных с патологией желчного пузыря.
Артефакты.
К артефактам, обнаруживаемым в желчи, относятся частички дуоденального зонда, кристаллы магнезии сульфата, осколки покровных стекол.
Простейшие, гельминты, грибы.
При исследовании желчи можно обнаружить яйца печеночной, кошачьей, ланцетовидной, китайской двуустки, а также особи стронгилид и трихостронгилид, вегетативную форму лямблий и грибы рода Candida. Диагностическое значение подвижных и неподвижных форм гельминтов и простейших одинаково.
Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике / Под ред. проф. М.А. Базарновой, проф. В.Т. Морозовой.- К.: Выща школа, 1988.- 318 с., 212 ил.