Нормы тромбоцитов, анализ по методу фонио, способы нормализации. Подсчет тромбоцитов в камере горяева Ручной подсчет тромбоцитов в крови

Норма: 180–320×109/л (200–400×109/л)
Тромбоциты (кровяные пластинки) - это безъядерные клетки диаметром 2–4 мкм, являющиеся «осколками» цитоплазмы мегакариоцитов костного мозга.

Морфология тромбоцитов

В крови здорового человека при световой микроскопии (окраска
по методу Романовского - Гимза) различают четыре основные формы тромбоцитов:

1. Нормальные (зрелые) тромбоциты (87,0 ± 0,13 %) - круглой или овальной формы диаметром 3–4 мкм; в них видна бледно-голубая наружная зона (гиаломер) и центральная (грануломер) с азурофильной зернистостью.

2. Юные (незрелые) тромбоциты (3,20 ± 0,13 %), несколько больших размеров с базофильной цитоплазмой, азурофильная грануляция (мелкая и средняя) располагается чаще в центре.

3. Старые тромбоциты (4,10 ± 0,21 %) могут быть круглой, овальной, зубчатой формы с узким ободком тем ной «цитоплазмы», с обильной грубой грануляцией, иногда наблюдаются вакуоли.

4. Формы раздражения (2,50 ± 0,1 %) больших размеров, вытянутые, колбасовидные, хвостатые, «цитоплазма» в них голубая или розовая, азурофильная зернистость рассеяна или разбросана неравномерно.

Гиаломер тромбоцитов (основа пластинки) ограничен трехслойной мембраной, которая, по-видимому, идентична мембране других клеток кроветворной ткани. Мембрана клетки инвагинирует и соединяется с сетью многочисленных каналов (так называемая открытая канальцевая система - ОКС), которые тесно переплетены внутри тромбоцита.

Наружная клеточная оболочка и ОКС усеяны гликопротеинами, играющими важную роль в адгезии и агрегации тромбоцитов.

В цитоплазме тромбоцитов можно обнаружить 4 вида гранул различной структуры, формы и величины, равномерно распределенные в кровяной пластинке или чаще собранные в ее центре (грануломер).

Наиболее многочисленные α-гранулы содержат тромбоцитоспецифические и тромбоцитонеспецифические пептиды, участвующие в механизмах коагуляции, воспаления, иммунитета и репарации.

Плотные гранулы представляют собой богатое хранилище АДФ и серотонина - веществ, способствующих агрегации тромбоцитов; а также антиагреганта АТФ и основного кофактора коагуляции Са2+. Лизосомальные гранулы содержат гидролитические ферменты, а пероксисомы - каталазу.

Функции тромбоцитов

Основные функции тромбоцитов

• Запуск немедленного гемостаза за счет адгезии и агрегации тромбоцитов, что приводит к формированию тромбоцитарной пробки;
• местное выделение вазоконстрикторов для уменьшения кровотока в пораженном участке;
• катализ реакций гуморальной системы свертывания с образованием в конечном счете фибринового сгустка;
• инициирование репарации ткани;
• регулирование местной воспалительной реакции и иммунитета.

Нестимулированные тромбоциты циркулируют в виде гладких дискоидных клеток с незначительной метаболической активностью. Такие тромбоциты не вступают в физиологически значимое взаимодействие с другими форменными элементами крови или монослоем эндотелиальных клеток.

Физиологическая активация тромбоцитов начинается только тогда, когда поврежден сосудистый эндотелий и обнажен субэндотелиальный внеклеточный матрикс. В тромбоцитарной мембране возникают волны возбуждения и формируется большое количество коротких нитевидных псевдоподий или филоподий. В результате этого процесса значительно увеличивается площадь поверхности мембраны, что необходимо для катализа реакций гуморальной системы. С инициированием активации тромбоцитов внутриклеточные органеллы сосредотачиваются в центре клетки, после чего происходит слияние мембран плотных и α-гранул друг с другом, с клеточной мембраной и с мембранами ОКС. Это приводит к экзоцитозу содержимого гранул в наружную микросреду. Происходящий в это время каскад аутоактивации тромбоцитов, синтез ромбоксана и выделение содержимого гранул приводят к появлению тромбоцитарного агрегата, прошитого фибриногеновыми мостиками с участием гликопротеина мембранных рецепторов соседних тромбоцитов.

Известно, что мегакариоциты синтезируют и депонируют в α-гранулах факторы свертывания V, VIII, XIII и фибриноген, которые выбрасываются в микросреду при активации тромбоцитов. Тромбоцитарные мембраны играют не менее важную роль в запуске специфических реакций свертывания.

Методы подсчета тромбоцитов

Метод Фонио

Наиболее распространенный метод подсчета тромбоцитов - метод Фонио (готовят мазок и красят его по Романовскому - Гимза; считают количество тромбоцитов, встретившихся при подсчете 1000 эритроцитов).

Подсчета тромбоцитов в камере Горяева

Существует также метод подсчета тромбоцитов в камере Горяева: кровь разводят 1% раствором оксалата аммония, или раствором, приготовленным по сложной прописи (см. ниже), или 5–7% раствором трилона Б (для предотвращения свертывания крови и агглютинации кровяных пластинок), заполняют камеру и подсчитывают тромбоциты по обычному правилу.

Метод люминесцентной микроскопии

Меньшее распространение получили методы определения количества тромбоцитов с помощью люминесцентной микроскопии.

Метод подсчета с использованием электронно-автоматических счетчиков

В настоящее время наиболее перспективен метод подсчета с использованием электронно-автоматических счетчиков в разведенной пробе после лизиса эритроцитов (для подтверждения данных лабораторного анализа необходимо исследовать мазок периферической крови).

Количественное определение тромбоцитов

Количественное определение тромбоцитов по методу Фонио

• Капилляром Панченкова набирают 14% раствор сернокислого магния или 6% раствор этилендиаминтетраацетата (ЭДТА) в количестве 25 мкл (до метки «75») и вносят в пробирку;
• кровь из пальца набирают полный капилляр (до метки «0») и выливают всю кровь в пробирку;
• содержимое пробирки тщательно перемешивают и из смеси готовят мазок, который фиксируют и окрашивают по Романовскому - Гимза. Если в качестве стабилизатора был взят раствор сернокислого магния, то продолжительность окраски составляет 2–3 часа, а при использовании раствора ЭДТА - 30–45 минут;
• наносят на край мазка - в тонкой его части - иммерсионное масло;
• считают количество тромбоцитов, встретившихся при подсчете 1000 эритроцитов; при подсчете, чтобы не сбиться, рекомендуется прибегать к ограничению поля зрения путем применения окуляров, поле зрения которых разделено сеткой.

Зная количество эритроцитов в 1 мкл крови и число тромбоцитов на 1000 эритроцитов, вычисляют количество тромбоцитов в 1 мкл крови.

где Э - число эритроцитов в 1 мкл.

Количественное определение тромбоцитов в камере Горяева

• В пробирку наливают 4 мл раствора, приготовленного по сложной прописи (3 г кокаина солянокислого, 0,25 г хлористого натрия, 0,025 г фурацилина, 100 мл дистиллированной воды)* или 4 мл 1% раствора оксалата аммония;

* На практике в клинических лабораториях, ввиду принадлежности кокаина к наркотическим веществам, используют пропись следующего состава: новокаина гидрохлорида 3,5 г; натрия хлорида 0,25 г; воды дистиллированной до 100 мл. Время гемолиза эритроцитов составляет около 60 мин.

• капиллярной пипеткой набирают 20 мкл крови, осторожно выдувают ее в пробирку с реактивом и ополаскивают пипетку. Смесь хорошо перемешивают и оставляют на 25–30 минут для гемолиза эритроцитов;
• после повторного перемешивания заполняют камеру Горяева, которую помещают во влажную камеру;
• через 5 минут производят подсчет количества тромбоцитов в 25 больших квадратах с использованием фазово-контрастного устройства.

Формула для подсчета тромбоцитов:

где а - количество тромбоцитов в 400 малых квадратах;
П - степень разведения (200).

Количественное содержание тромбоцитов

Норма: 180–320 × 109/л (200–400 × 109/л)

Увеличением количества тромбоцитов характеризуются:

• миелопролиферативные процессы (эритремия, миелофиброз);
• хронические воспалительные заболевания (ревматоидное поражение суставов, язвенный колит, туберкулез, остеомие лит, цирроз печени);
• злокачественные новообразования (рак, лимфома, лим фо гра нуле матоз);
• кровотечения, гемолитическая анемия;
• период выздоровления при мегалобластных анемиях;
• после операций;
• состояние после спленэктомии;
• лечение кортикостероидами.

Уменьшением количества тромбоцитов (тромбоцитопенией) характеризуются:

• наследственные тромбоцитопении, вызванные снижением образованиятромбоцитов(врожденнаятромбоцитопения, синдром Уискотта-Олдрича, синдром Бернара - Сулье, аномалия Чедиака - Хигаси, синдром Фанкони, краснуха новорожденных, гистиоцитоз);
• болезни крови (апластическая анемия, мегалобластные анемии, лейкозы);
• поражение костного мозга (метастазы новообразований, туберкулезное поражение, ионизирующее облучение);
• другие заболевания (циклическая тромбоцитопения, пароксизмальная ночная гемоглобинурия, гемолитико-уремический синдром, почечная недостаточность, заболевания печени, опухоли сосудов, селезенки, эклампсия, гипертиреоз, гипотиреоз);
• инфекции (вирусные, бактериальные, риккетсиозы, маля рия, токсоплазмоз, ВИЧ-инфекция);
• беременность, менструации;
• действие лекарственных препаратов (цитостатиков, анальгетиков, антигистаминных средств, антибиотиков, психотропных лекарств, диуретиков, противосудорожных средств, витамина К, резерпина, дигоксина, гепарина, нитроглицерина, преднизолона, эстрогенов и др.);
• действие алкоголя, тяжелых металлов;
• тромбоцитопении, вызванные повышенным потреблени ем тромбоцитов (тромбоцитопеническая пурпура, гиперспленизм, ДВС-синдром, кровотечения, гемодиализ).

Кровяные пластинки обладают групповой специфичностью, соответствующей групповой специфичности эритроцитов. Это должно учитываться при переливании тромбоцитарной массы.

Тромбоциты участвуют во всем процессе свертывания крови, начиная от образования первичного тромба в области повреждения кровеносных сосудов и заканчивая участием в процессах регулирования проницаемости и тонуса сосудов.

Подсчет максимально точного количества тромбоцитов осуществляется при помощи камеры Горяева и метода Фонио. Подсчет тромбоцитов по Фонио довольно точен. Метод Фонио является наиболее удобным именно при автоматическом подсчете.

Необходимые реактивы

Для определения точного количества тромбоцитов по данному методу потребуются такие реактивы как:

• раствор сульфата магния 14% (обязательно стерильный);
• краситель Романовского – Гимзы;
• фиксаторы Лейшмана либо Май-Грюнвальд.

Как готовится препарат

Кожа пальца вытирается максимально на сухо и аккуратно прокалывается.

Затем на кожу наносят маленькую капельку раствора сульфата магния и после смешивают его с выделившейся каплей крови. Из получившейся смеси готовят мазки, которые высушивают и открашивают по Паппенгейму.

Как считаются тромбоциты

В мазке, подвергнутом окрашиванию, считают 1000 эритроцитов и все попавшиеся тромбоциты. В итоге получается число, выражаемое промилле. Чтобы получить абсолютное количество тромбоцитов нужно данную величину перемножить на количество эритроцитов, имеющихся в 1 мкл, а затем разделить на 1000.

К примеру, если в мазках обнаружено 64 промилле тромбоцитов, эритроциты считаются 5 x 10 в 1 мкл, а тромбоциты 64 x 3,5 x 10 разделить на 1000 равно 224 x 10 в 3 степени в 1 мкл.

Исследуемый образец. Капиллярная кровь.

Принцип метода. Тромбоциты подсчитываются в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимза на 1000 эритроцитов с последующим пересчетом на 1 л крови.

Реактивы и оборудование. Микроскоп. Пробирки (1х10 см), пипетки от аппарата Панченкова, 14% раствор сульфата магния или 6% водный раствор этилен-диаминотетраацетата натрия (ЭДТА), метиловый спирт.

Выполнение метода. Капилляром Панченкова набирают раствор сульфата магния или ЭДТА до метки “75” и вносят в пробирку. Туда же вносят кровь, взятую из пальца аппаратом Панченкова до метки “0”. Содержимое тщательно перемешивают. Из смеси готовят тонкие мазки, фиксируют их метиловым спиртом 10 минут и окрашивают по Романовскому-Гимза. В каждом поле зрения микроскопа подсчитывают число эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов.

Рисунок 10. Тромбоциты периферической крови в окрашенном мазке.

Оценка результатов. Зная количество эритроцитов в 1 л, рассчитывают число тромбоцитов. Пределы колебаний количества тромбоцитов, определенного этим методом, и трактовка результатов совпадают с результатами фазово-контрастного микроскопирования.

Примечания. Мазки окрашиваются 2 - 3часа, если используется сернокислая магнезия и 35 - 40 минут, если употребляется ЭДТА.

2.2.3. Подсчет тромбоцитов с использованием гематологических анализаторов.

Данный метод находит в последние годы все большее применение в клинической практике, поскольку автоматический подсчет клеток с использованием современных электронных приборов значительно облегчает и ускоряет исследование. Кроме того, помимо подсчета количества тромбоцитов (PLT), анализаторы способны определять несколько тромбоцитарных индексов:

· MPV - средний объем тромбоцитов - данный показатель увеличивается с возрастом: с 8,6 - 8,9 фл у детей 1 - 5 лет до 9,5 - 10,6 фл у людей старше 70 лет. "Молодые" кровяные пластинки имеют больший объем, поэтому при ускорении тромбоцитопоэза средний объем тромбоцитов возрастает. Увеличение показателя MPV наблюдается у больных с идиопатической тромбоцитопенической пурпурой, тиреотоксикозом, сахарным диабетом, миелопролиферативными заболеваниями, атеросклерозом; а также у курильщиков и лиц, злоупотребляющих алкоголем. Снижение наблюдается после спленэктомии, при синдроме Вискотта-Олдрича.

· PDV - распределение тромбоцитов по объему - измеряется в процентах (коэффициент вариации тромбоцитометрической кривой) и количественно отражает гетерогенность популяции этих клеток по размерам (степень анизоцитоза тромбоцитов). В норме показатель составляет 1-20%. Результаты могут быть выражены в виде кривой - тромбоцитарной гистограммы. Наличие в крови преимущественно молодых форм (макротромбоцитоз) приводит к сдвигу гистограммы вправо; старые формы с меньшими размерами находятся в гистограмме слева. (рисунок 11).

Рисунок 11. Тромбоцитарная гистограмма (а ) в норме; (б) тромбоцитопения; (в ) гипертромбоцитоз, макротромбоцитоз.

· РСТ - тромбокрит - отражает долю объема цельной крови, занимаемую тромбоцитами. Он аналогичен гематокриту и выражается в процентах. В норме тромбокрит составляет 0,15 - 0,40%.

2.3. Морфологический анализ тромбоцитов (тромбоцитарная формула).

Принцип метода. Для постановки диагноза тромбоцитопатии кроме подсчета количества тромбоцитов необходимо изучить их размеры, форму и структуру. Последняя наиболее хорошо выявляется после паноптической окраски тромбоцитов по Нохту (смесью азура и эозина).

Реактивы. Абсолютный метиловый спирт, который получают добавлением в сосуд с продажным метиловым спиртом просушенного до постоянного веса химически чистого медного купороса. Сосуд герметически закупоривается. Перед употреблением готовят смесь красок из 10 частей раствора азура, 5 частей раствора эозина и 10 частей водопроводной воды. Азур II и эозин используются в разведении 1:1000.

Ход определения. Мазки готовятся без стабилизатора (ЭДТА или сернокислой магнезии). Их фиксируют 15 минут в абсолютном метиловом спирте и красят 45 минут смесью красок.

Оценка результатов. Если в мазке некоторые тромбоциты образуют скопления по 5-6 пластинок, считается, что это хорошая агрегация.

Тромбоциты здорового человека обычно округлые ли овальные. 90 - 92% из них являются нормотромбоцитами (их диаметр в 3 - 3,5 раза меньше диаметра эритроцитов здорового человека и составляет 1,5 - 3 мкм). 8 - 12% тромбоцитов относятся к микропластинкам (диаметр 1 - 1,5 мкм), макропластинкам (диаметр 3,5 - 5 мкм) и мегатромбоцитам (6 - 10 мкм) (рис.12 ).

Структура тромбоцитов отражает степень их зрелости. Различают юные, зрелые и старые кровяные пластинки. Не всегда встречаются в крови здорового человека тромбоциты раздражения и дегенеративные пластинки.

Юные формы тромбоцитов отличаются от зрелых несколько большей величиной (2 - 5 мкм), нерезкими контурами, выраженной базофилией гиаломера и нежной необильной азурофильной зернистостью.

Зрелые формы - наиболее типичные - округлые или овальные, с ровными контурами, диаметром 2 - 4 мкм, в них четко разделяются грануломер с хорошо выраженной красно-фиолетовой зернистостью и голубовато-розовый (сиреневый) гиаломер.

Рисунок 12. Семь малых, два больших и два мегатромбоцита в мазке периферической крови.

У старых форм тромбоцитов насыщенно-фиолетовый грануломер на всю центральную часть кровяной пластинки и светло-розовый узкий гиаломер по периферии. Пластинки как бы сморщены, диаметр составляет 0,5 - 2,5 мкм.

Тромбоцитам раздражения свойственны большой полиморфизм и значительная величина. Встречаются гигантские колбасовидные, хвостатые и т.п. пластинки диаметром 7 - 9 и даже

12 мкм (рис. 13 А, Б ).

Рисунок 13. Гигантские аномальные тромбоциты в мазках периферической крови.

Дегенеративные формы не содержат зернистости (гиалиновые, голубые пластинки) или имеют темно-фиолетовую зернистость в виде комков или мелких осколков (пылинок), встречаются и вакуолизированные пластинки.

Практическое значение. Тромбоцитарная формула здоровых людей: юные 0 - 0,8%; зрелые 90 - 95%; старые 2 - 5,5%; дегенеративные - 0 - 0,2%; раздражения 0,8 - 2,5%; вакуолизированные - 0%.

Повышение числа юных форм (“омоложение” или сдвиг тромбоцитарной формулы влево) отмечается при повышении регенерации костного мозга (гемолитическом кризе, посттрансфузионных осложнениях, лейкозе, после кровопотери, спленэктомии и др.).

Большое число старых форм (“постарение” или сдвиг тромбоцитарной формулы вправо) чаще всего обнаруживается у больных раком. Формы раздражения присущи тромбоцитопеническим состояниям. Количество старых и дегенеративных форм увеличивается у больных наследственными и симптоматическими тромбастениями, циррозом печени, при отравлении бензолом.

При миелопролиферативных заболеваниях (хроническом миелолейкозе, тромбоцитемии, полицитемии и др.) в периферической крови наряду с формами раздражения встречаются “тромбобласты” - фрагменты ядер мегакариоцитов, которые окружены цитоплазмой с отшнуровывающимися пластинками.

Анализ тромбоцитов по Фонио - это распространенный метод микроскопического исследования, позволяющий получить наиболее информативные и точные данные.

Рассмотри в чем суть этого анализа, как он проводится, какие преимущества и недостатки у него существуют и каковы нормальные показатели.

Тромбоциты - это самые мелкие безъядерные элементы крови сферической формы, образующиеся в процессе синтеза из крупных клеток (мегакариоцитов) костного мозга.

Они играют важнейшую роль в механизмах первичного и вторичного гемостаза, при повреждении сосудов.

Тромбоциты стоят на первой линии обороны при возникновении кровотечений.

Более того, они являются источником ферментов (факторов регенерации и роста), которые способствуют следующим процессам:

• стимулируют клеточный синтез;
• регенерируют ткани;
• содействуют эластичности стенок артерий;
• участвуют в регуляции уровня проницаемости клеточных мембран.

Как и лейкоциты, тромбоциты имеют свой цикл жизнедеятельности (не более 7 дней) и деление по фазе созревания - молодые, зрелые, старые. Однако процесс старения у них выражен наиболее ярко.

В норме у здорового человека уровень зрелых клеток должен колебаться в пределах 95%.

Отклонения от нормы указывают на следующее:

• высокая концентрация молодых клеток - развитие многочисленных нарушений в кровеносной системе;
• присутствие в крови дегенеративных (старых) клеток - дестабилизация производства и переработки кровяных телец.

По количеству тромбоцитов можно определить состояние свертывающей системы человека. Превышение нормы носит название тромбоцитоз, понижение - тромбоцитопения.

В чем заключается метод Фонио?

Метод Фонио - это анализ крови из пальца на основе микроскопии мазка. Количество тромбоцитов высчитывается по формуле относительных отклонений от абсолютного суммарного значения эритроцитов.

Анализ проводят без ограничений по возрасту или половому признаку, поэтому он разрешен даже для новорожденных и беременных женщин.

Суть методики - точный подсчет пониженного или повышенного числа тромбоцитов, позволяющий заранее выявить развитие патологий различного происхождения. Результаты метода используют для коррекции терапевтического лечения.

Преимущества и недостатки

Сегодня существует много других, даже более технологичных, исследований. Однако в большинстве случаев врачи прибегают именно к методу Фонио, который имеет ряд существенных преимуществ.

Таблица с указанием плюсов метода:

Единственным недостатком метода считается плохое качество мазка или неравномерность распределения кровяных клеток по лабораторному стеклу, в результате чего иногда отмечаются большие погрешности.

На достоверность результатов может повлиять и неграмотность или халатность лаборанта, а также оборудование для исследований низкого качества.

Подготовка к процедуре

Помимо этого, чтобы получить достоверные данные подсчета тромбоцитов по методу Фонио, пациенту необходимо соблюдать простые правила подготовки к сдаче крови:

• В течение 3 дней необходимо воздержание от спиртного, жирного, жареного.
• Сдавать кровь нужно натощак, с последнего приема пищи и жидкости должно пройти не менее 8 часов.
• Накануне вечером необходимо отказаться от любых физических нагрузок.
• На забор крови пациент приходит в утренние часы в строго установленное время.

При получении сомнительного результата анализ проводится 2-3 раза с интервалом не более 5 суток.

Как производится подсчет?

Для определения тромбоцитарного индекса используют следующие реактивы:

• магния сульфат - стерильный 14%-й раствор;
• пигмент Романовского-Гимзы (красящее вещество);
• фиксатор (Лейшмана или Май-Грюнвальда).

Процесс проведения:

1. Палец вытирается насухо, прокалывается.
2. На место прокола наносится капля раствора сульфата магния для смешивания с кровью.
3. Из кровяной смеси делают мазки, которые сушат и окрашивают.

Подсчет тромбоцитов проводится по формуле: У = А х В/1000.

Где А - абсолютное значение эритроцитов, В - количество тромбоцитов.

Схема расчета следующая:

1. В мазке вычисляют 1000 эритроцитов + выявленные тромбоциты.
2. Для получения абсолютного значения полученная величина умножается на количество эритроцитов на 1 мкл и делится на 1000.
3. Полученная сумма выражается в промилле.

Нормальные значения

Количество тромбоцитов во многом зависит от возраста и факторов, влияющих на изменение объема крови.

У грудничков диапазон значений довольно широкий, так как он определяется по общему состоянию ребенка. Относительно стабильными показатели становятся после 4 лет.

У представительниц слабого пола на показатели влияет то, на какой день и даже в какое время суток наступает менструальный цикл. От него зависит скорость выработки тромбоцитов.

Во время беременности и в период менструации показатели могут снижаться до 150 тыс/мкл, что считается нормой. Однако значение ниже этого уровня или постоянно сниженные показатели могут свидетельствовать о патологическом состоянии.

У мужчин процесс обновления клеток происходит с постоянной регулярностью. В связи с чем нижняя граница нормы у них выше, чем у женщин.

Нормальные значения у взрослых указаны в этой таблице:

У детей показатели будут следующими:

Почему они могут быть понижены или повышены?

При отклонениях от нормы назначают повторный анализ. Если результаты подтверждаются неоднократно, то это говорит о развитии патологии.

Превышение нормы (тромбоцитоз или тромбофилия) происходит на фоне следующих деструктивных состояний:

• нарушение работы костного мозга;
• менингококковая инфекция;
• наличие в организме воспалительного процесса;
• некроз в тканях;
• развитие онкологии (лимфогранулематоз, миелолейкоз);
• прием медикаментозных средств;
• после удаления селезенки;
• серьезные кровопотери после открытой травмы или хирургической операции (стентирование, коронарное шунтирование);
• дисфункция работы печени или почек (эритроцитоз, рак);
• туберкулез или пневмония;
• хронические заболевания кроветворной системы;
• общие факторы - физические перегрузки, обезвоживание, отравление, стрессы.

Если тромбоциты повышены у женщины в период беременности, то это опасное состояние, угрожающее серьезными осложнениями:

• токсикоз ярко выраженной формы;
• выкидыш (произвольное прерывание беременности);
• задержка развития у плода;
• варикозное расширение вен;
• тромбоз (или тромбофлебит) нижних конечностей;
• тромбоэмболия (закупорка кровеносного сосуда мозга, сердца, легочной артерии и т. д.), на фоне которой развиваются инфаркты, инсульты и даже гангрены.

Низкие показатели или тромбоцитопения часто наблюдается у недоношенных малышей. Подобные аномалии обычно возникают на фоне недоразвития органов или систем.

Факторы, способствующие снижению тромбоцитов у новорожденных:

• инфицирование плода внутри утробы;
• несовместимость группы крови у матери и плода;
• асфиксия во время родов;
• наследственная анемия.

Причины понижения тромбоцитов у взрослых людей и детей старше 4 лет:

• облучение (радиация);
• интоксикация ядами или химией (свинцом);
• болезни крови;
• злокачественная онкология;
• аллергии сложного типа;
• коллагенозы;
• заболевания печени (цирроз, гепатит);
• после гемодиализа;
• дисфункции щитовидной железы;
• инфекции различной этиологии;
• аутоиммунные патологии;
• обильные кровопотери;
• хронический нефрит;
• алкоголизм;
• наследственность.

Недостаток тромбоцитов часто сопровождается следующими симптомами:

• частые кровотечения из носа;
• подкожные и внутренние геморрагии;
• петехии (точечные геморрагии);
• обширные гематомы или кровоподтеки;
• обильная менструация, которая длится больше обычного.

Для установки точного диагноза требуется дополнительное инструментальное обследование, а также посещение врачей узкого профиля.

Как привести уровень тромбоцитов в норму?

Основной метод нормализации уровня содержания тромбоцитов - провести лечение заболевания, которое явилось причиной отклонений.

Пониженный уровень повышают при помощи:

• приема препаратов, стимулирующих выработку телец;
• приема витаминов (К, В12, фолиевую кислоту, железо);
• применения народных средств - крапива в любом виде (отвар, сок, настой), кунжутное масло, настойка вербены.

Нужно исключить из рациона:

• лук, чеснок, острые специи, имбирь;
• маринады и соленья;
• жирную рыбу;
• темный виноград.

И включить в ежедневное меню:

• каши (греча, рис, чечевица);
• крольчатину, индейку;
• говяжий язык, сердце, печень;
• орехи, зелень, зеленый чай.

• прием препаратов, включающих ацетилсалициловую кислоту;
• пропить витаминный комплекс на основе магния;
• исключить - шиповник, бананы, манго, гранат;
• включить в рацион - клюкву, облепиху, свеклу, томаты;
• потреблять достаточное количество жидкости.

Существуют следующие методы определения количества тромбоцитов в единице объема крови:

1) методика Фонио;

2) подсчет в камере Бюркера с сеткой Горяева;

3) использование фазоконтрастной и люминисцентной микроскопии;

4) электронно-автоматический метод (счетчики «Культер», «Целлоскоп»).

Для подсчета тромбоцитов периферической крови ча­ще всего применяют методику Фонио.

Оборудование и реактивы:

1) 14% раствор магния сульфата.

Ход исследования: для предупреждения склеивания тромбоцитов предварительно на место укола пальца нано­сят каплю 0,14 % раствора магния сульфата и через нее де­лают прокол. Выступившую каплю крови смешивают с каплей магния сульфата и делают мазок, который окра­шивают по Романовскому-Гимзе. Затем в мазке под мик­роскопом с иммерсионной системой одновременно подсчи­тывают 1000 эритроцитов и находящиеся среди них тром­боциты. Последние встречаются в препарате либо в оди­ночку, либо чаще разбросаны кучками между эритроцита­ми. По величине тромбоцит занимает приблизительно 1/3-1/4 эритроцита. Тромбоциты не имеют ядра и их ци­топлазма окрашена в синеватый цвет с красноватым от­тенком в центре. Зная содержание эритроцитов в 1 л кро­ви, легко вычисляют абсолютное количество тромбоцитов.

Нормальное количество тромбоцитов в периферической крови: 180.0 – 320.0 х 10 9 /л. (150-450 х 10 9 /л согласно рекомендациям ВОЗ).

Интерпретация полученных данных.

Причины увеличения числа тромбоцитов (тромбоцитоза).

Миелопролиферативные заболевания - хронический миелолейкоз, эритремия, эссенциальная тромбоцитемия.

Воспалительные процессы – острая ревматическая лихорадка, ревматоидный артрит и др.

Злокачественные опухоли - лимфогранулематоз, рак.

Острая кровопотеря и гемолитические анемии.

Спленэктомия.

Причины уменьшения количества тромбоцитов (тромбоцитопении).

Врожденные (синдром Вискотта-Олдрича и др.) и приобретенные (идиопатическая иммунная тромбоцитопеническая пурпура, СКВ и др.), иммунодефициты.

Апластическая, витамин-В 12 -фолиеводефицитная, тяжелая железодефицитная анемии.

ДВС-синдром, гемангиомы.

Вирусные инфекции, риккетсиозы, малярия.

Гиперспленизм.

«Синие» врожденные пороки сердца, застойная сердечная недостаточность.

Лучевая болезнь.

Лекарственные воздействия (цитостатики).

6. Методика сбора мокроты.

Мокротой называется патологический секрет, выделяемый с кашлем из дыхательных путей. Мокрота собирается в чистую широкогорлую стеклянную посуду с закручивающейся крышкой в утренние часы при кашле, после тщательного полоскания рта и горла, до приема пищи. Собирать мокроту за сутки и больше нецелесообразно, так как длительное стояние ведет к размножению флоры и аутолизу клеточных элементов. При необходимости мокроту сохраняют в прохладном месте (в холодильнике).

Источником наиболее ценной информации является содержимое трахеобронхиального дерева, полученное при бронхоскопии (промывные воды бронхов).

7. Исследование мокроты: макроскопическое, микроскопическое, бактериоскопическое. Понятие о бактериологическом методе исследования мокроты.

При макроскопическом изучении обращают внимание на: характер мокроты, количество, цвет, запах, консистенцию, слоистость, наличие различные включений.

Характер мокроты определяется ее составом.

Слизистая – состоит из слизи (продукта слизистых желез дыхательных путей). Выделяется при острых бронхитах, разрешении приступа бронхиальной астмы.

Слизисто-гнойная – представляет смесь слизи и гноя, причем слизь преобладает, а гной включен в виде комочков или прожилок. Наблюдается при хронических бронхитах, бронхопневмонии.

Гнойно-слизистая – содержит слизь и гной (преобладание гноя, слизь имеет вид тяжей). Характерна для хронических бронхитов, бронхоэктазии, абсцедирующей пневмонии.

Гнойная – не имеет примеси слизи и появляется в случае открытого в бронх абсцесса легкого, при прорыве эмпиемы плевры в бронх.

Слизисто-кровянистая – состоит из слизи с прожилками крови или кровяного пигмента. Отмечается при катарах верхних дыхательных путей, бронхогенном раке, пневмонии.

Слизисто-гнойно-кровянистая – содержит слизь, гной и кровь, чаще равномерно перемешанные между собой. Появляется при бронхоэктазах, туберкулезе, актиномикозе легких, бронхогенном раке.

Кровавое отделяемое (кровохаркание) – встречается при туберкулезе, опухолях бронхов и легкого, ранении легкого, актиномикозе.

Серозное отделяемое – характерно для отека легких, представляет собой пропотевшую в полость бронхов плазму крови.

Количество мокроты (величина отдельных порций и суточные количества) зависят от характера заболевания и от способности больного к отхаркиванию.

Скудное количество мокроты – характерно для воспаления дыхательных путей (трахеит, острый бронхит в начальной стадии, бронхиальная астма, бронхопневмония).

Обильное количество мокроты (от 0.5 до 2 л) выделяется обычно из полостей легочной ткани, бронхов (бронхоэктатическая болезнь, абсцесс легкого, прорыв эмпиемы), при повышенном кровенаполнении легких и пропотевании в легкие и бронхи большого количества плазмы крови (отек легких).

Цвет и прозрачность мокроты зависят от ее характера и от состава вдыхаемых частиц.

Слизистая мокрота – стекловидная, прозрачная; слизисто-гнойная – стекловидная с желтым оттенком; гнойно-слизистая – желто-зеленоватая; гнойная – желто-зеленая; слизисто-кровянистая – стекловидная с кровянистым или ржавым оттенком; слизисто-гнойно-кровянистая – стекловидная с желтыми комочками, прожилками красного цвета или ржавыми оттенками; отделяемое при легочном кровотечении – жидкое, красного цвета, пенистое; при распаде опухоли легкого может наблюдаться мокрота в виде «малинового желе»; отделяемое при отеке легких – жидкое, прозрачно-желтое с опалесценцией, пенистое и клейкое.

Мокрота с инородными примесями имеет цвет этих примесей: белая у мукомолов, черная у шахтеров и др.

Запах у мокроты появляется при длительном стоянии, а также при задержке мокроты в бронхах или полостях в легком и обусловлен деятельностью бактерий, вызывающих гнилостный распад белков. Свежевыделенная мокрота обычно не имеет запаха. Мокрота имеет неприятный запах при бронхоэктатической болезни, абсцессе легкого, туберкулезе, злокачественных новообразованиях с некрозом; зловонный (гнилостный) запах отмечается при гангрене легкого.

Консистенция тесно связана с характером мокроты и может быть вязкой, густой и жидкой. Вязкость зависит от содержания слизи и от количества форменных элементов - лейкоцитов, эпителия. Наиболее вязкая мокрота обнаруживается при муковисцидозе и бронхиальной астме.

Слоистость мокроты. При бронхоэктазах, гнилостном бронхите, абсцессе и гангрене легкого мокрота при стоянии разделяется на три слоя: на дне посуды находятся тяжелые элементы мокроты – гной и детрит, образующийся вследствие распада легочной ткани; средний слой составляет серозная жидкость; в верхнем – плавающие частицы, содержащие воздух и слизь.

В мокроте можно выявить:

1) спирали Куршмана – штопорообразно извитые трубчатые тела, имеющие диагностическое значение при бронхиальной астме;

2) фибринозные свертки – древовидно разветвленные образования эластичной консистенции, имеющие значение при фибринозном бронхите, реже - при крупозной пневмонии;

3) рисовидные тельца (линзы Коха) – плотные образования творожистой консистенции, состоящие из детрита, туберкулезных палочек и эластических волокон; обнаруживаются при кавернозном туберкулезе легких;

4) гнойные пробки Дитриха – состоят из детрита, бактерий, кристаллов жирных кислот, встречаются при гангрене легкого;

5) дифтеритические пленки;

6) некротизированные кусочки легкого;

7) частицы опухоли легкого;

8) друзы актиномицетов;

9) элементы эхинококка;

10) случайно попавшие из полости инородные тела (семена подсолнечника и др.).

Микроскопическое исследование мокроты.

Микроскопическое исследование мокроты проводят в свежих неокрашенных и фиксированных окрашенных препаратах.

Элементы мокроты, которые обнаруживаются в нативном препарате, можно разделить на три основные группы.

Клеточные элементы – плоский эпителий (одиночные клетки встречаются всегда, множественные – при воспалительных явлениях в ротовой полости); цилиндрический эпителий (встречается при остром катаре верхних дыхательных путей, остром бронхите, бронхиальной астме); макрофаги «жировые шары» (встречаются при раке легкого, туберкулезе, актиномикозе), сидерофаги – «клетки сердечных пороков», макрофаги с гемосидерином (обнаруживают при застое в малом круге кровообращения, при инфаркте легкого), кониофаги – пылевые макрофаги (характерны для пневмокониозов и пылевых бронхитов); опухолевые клетки; лейкоциты (в слизистой мокроте – единичные, в гнойной – покрывают все поля зрения); эритроциты (единичные могут быть в любой мокроте, окрашенной кровью).

Волокнистые образования – эластические волокна, которые указывают на распад легочной ткани при туберкулезе, абсцессе, опухоли, коралловые волокна (отложение на эластичном волокне жирных кислот и мыл) и обызвествленные волокна (пропитанные солями извести); фибринозные волокна (при фибринозном бронхите, крупозной пневмонии, иногда при актиномикозе); спирали Куршмана.

Кристаллические образования – кристаллы Шарко-Лейдена (продукт кристаллизации белков распавшихся эозинофилов, встречается при бронхиальной астме, глистных поражений легких), кристаллы гематоидина (обнаруживаются при кровоизлияниях в легочную ткань, в некротизированной ткани), кристаллы холестерина (встречаются при задержке мокроты в полостях – туберкулез, абсцесс, эхинококкоз); кристаллы жирных кислот – также образуются при застое мокроты в полостях легкого.

Окраску препаратов производят с целью изучения клеток крови в мокроте и для бактериологического исследования.

Для изучения клеток крови в мокроте применяют способ окрашивания по Романовскому-Гимзе. При этом способе окраски удается дифференцировать клетки лейкоцитарного ряда, эритроциты, однако, наибольшее значение имеет выделение эозинофилов (эозинофилия мокроты свойственна для бронхиальной астмы, глистного поражения легких, эозинофильной пневмонии).

Бактериоскопическое исследование мокроты с окраской по Грамму имеет ориентировочное значение для выявления грамм-положительной и грамм- отрицательной микрофлоры. Окраска по Цилю-Нильсену производится с целью обнаружения микобактерий туберкулеза.

В случае, когда при бактериоскопии из-за малого количества микобактерий туберкулеза обнаружить из не удается, прибегают к ряду дополнительных исследований (люминесцентная микроскопия, методы накопления бактерий – флотация и электрофорез).

Иногда в окрашенном препарате можно выявить различные виды грибов – аспергиллы, кандиды, актиномицеты.

Бактериологическое исследование мокроты.

Бактериологический метод позволяет выделить возбудителя заболевания в чистом виде при посеве мокроты на питательные среды, определить вирулентность и лекарственную устойчивость (чувствительность) выделенного микроорганизма, что необходимо для рационального подбора антибактериальных средств. В некоторых случаях производят заражение экспериментальных животных мокротой, полученной от больного человека.