Главная
Невралгия
Скрининговый массовый тест в диагностике вич инфекции. Современные методы диагностики вич-инфекции

Скрининговый массовый тест в диагностике вич инфекции. Современные методы диагностики вич-инфекции

и

Антитела к ВИЧ 1/2 – составляющие плазмы крови, белковой природы, которые препятствуют размножению ВИЧ-инфекции и полностью нейтрализуют их негативное влияние.

Что такое анализ на антитела к ВИЧ 1/2 (скрининг)

Скрининговый анализ на антитела к ВИЧ 1,2 – система тестов, которые позволяют выявить лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита. Помимо этих, существуют и так называемые подтверждающие (вспомогательные)тесты, задача которых заключается в том, чтобы выявить лиц не инфицированных вирусом, но с положительной реакцией на вирус при скрининге.

Суть скринингового исследования ВИЧ-инфекции заключается в определении антител к вирусу иммунодефицита. Его отличительная особенность в повышенной чувствительности – более, чем 99,5%. Специфика тестирования состоит в том, что скрининг может дать ложноположительный результат, если в организме пациента содержатся аутоантитела.

Идентичный результат может быть выявлен и в случае болезни печени у пациента, противогриппозной вакцинации или же наличия какого-либо острого вирусного заболевания. Исходя из этого, для получения точных результатов, наряду со скринингом, обычно принято делать и упомянутый выше, подтверждающий тест.

Показания для анализа

В медицинской практике существует достаточно обширный спектр показаний для прохождения скринингового обследования. Пациент может обратиться в в случае:

  • возникновения подозрения на инфицирование (если имелся близкий контакт с носителем ВИЧ-инфекции);
  • при потерях веса, лихорадке;
  • пневмонии, которая не поддается обычной терапии;
  • заболеваниях хронического характера, возникших по непонятным причинам;
  • в процессе подготовки к хирургической операции;
  • переливания крови;
  • планировании беременности и семьи;
  • При воспаленных лимфоузлах;
  • Случайных половых связях.

Лица, попадающие в особую группу риска: наркоманы и люди, ведущие беспорядочную половую жизнь.

Как проводится скрининг на на антитела к ВИЧ 1/2

Проведение процедуры подразумевает соблюдение ряда необходимых правил:

  • пациент должен сдавать кровь исключительно натощак (пить воду разрешено);
  • с момента последнего приема пищи должно пройти не менее восьми часов;
  • врач должен быть уведомлен о том, какие лекарства принимает пациент и знать дозировку (если нет возможности даже кратковременной их отмены);
  • если пациент в состоянии повременить с применением лекарственных средств, ему рекомендовано это сделать за 10-15 дней до дня манипуляции;
  • за день до начала тестирования пациенту желательно отказаться от приема жареных или жирных продуктов, также ему запрещено употреблять алкогольные напитки, курить, ограничить тяжелые физические нагрузки.

Необходимо отметить, что лабораторные исследования на наличие инфекции у детей, которые были рождены от матерей-носителей вируса иммунодефицита, имеют свою специфику.

Перед тестированием или скринингом на антитела к ВИЧ стоят две широкие, но очень четко определенные цели - выявление случаев и эпидемиологический надзор. При выявлении случаев прежде всего нужно уточнить статус инфицированности ВИЧ каждого данного индивидуума для назначения соответствующего лечения или для наблюдения с принятием надлежащих мер.

Цель эпидемиологического надзора заключается в оценке распространенности ВИЧ, распределения случаев инфекции и ее тенденций в группе или целой популяции.

Чувствительность теста на антитела к ВИЧ есть мера его способности точно выявлять эти антитела в пробе, а специфичность теста - мера его способности точно подтверждать отсутствие антител, если их в пробе нет. В идеале чувствительность и специфичность теста должны достигать 100%. На практике же ни один биологический тест этому требованию не удовлетворяет и тем не менее применяемые тесты на антитела к ВИЧ принадлежат к числу наиболее чувствительных и специфичных тестов, имеющихся в настоящее время

Лабораторная диагностика СПИДа состоит в проведении вирусологических, серологических, иммунологических исследований материала от больных лиц с подозрением на это заболевание.

При вирусологических исследованиях с целью выделения вируса могут быть использованы первичные культуры мононуклеарных клеток крови. Выделение и идентификация вируса методически сложны и могут выполняться в специализированных лабораториях. Наиболее эффективным методом диагностики, используемым в настоящее время для повседневных массовых обследований, является обнаружение антител к вирусу иммунодефицита человека. Антитела к ВИЧ могут появляться к концу первого месяца заражения. Поданным ряда авторов, для развитиясероконверсии требуется от 4-7 недель до 6 месяцев и больше. Наличие антител имеет диагностическое значение при СПИДе или указывает на риск его развития. Антитела - не только серологический маркер СПИДа. Выявляясь в предклинической фазе заболевания, они позволяют осуществить его раннюю диагностику. Особую значимость их наличие приобретает для обнаружения носителей. Антитела выявляются в течение многих лет, практически на протяжении всей жизни. Исследователи установили параллелизм в выявлении вируса и антител к нему, т. е. наличие антител к вирусу иммунодефицита указывает на высокую вероятность того, что человек является вирусоносителем.

Антитела к антигену ВИЧ, появившись в инкубационном периоде, продолжают интенсивно вырабатываться с развитием болезни, так как антигенное раздражение стимулируется и вирионами, выделяющимися из зараженных лимфоцитов, и субвирионными компонентами, попадающими в кровоток при распаде зараженных клеток, и зараженными лимфоцитами. В то же время провирус, встроенный в геном зараженных клеток, остается недоступным для специфических антител. Этим и объясняется, казалось бы, парадоксальный факт: чем больше антител к вирусу иммунодефицита человека в сыворотке крови, тем легче выделить сам вирус от больного. Происходит это потому, что антитела, вырабатывающиеся в ответ на инфекцию вируса, не являются нейтрализующими и вследствие этого не оказывают заметного влияния на вирус, а просто присутствуют в организме вместе с ним. Для обнаружения антител (AT) к вирусу СПИДа разработан ряд тестов, позволяющих осуществить исследования на достаточно высоком уровне специфичности и чувствительности. Это методы твердофазного радиоиммунологического анализа, радиоиммунопреципитации, иммунофлюоресцен-ции, иммуноферментного анализа и иммунного блотинга. Наиболее широкое применение в практике нашли методы иммуноферментного анализа (ИФА), который отличается высокой чувствительностью, возможностью количественного и визуального учета результатов реакции, что делает метод доступным для лаборатории любого уровня. В ИФА используются зарубежные и отечественные тест-системы.

Надо проявлять осторожность в отношении детей, рожденных от инфицированных матерей. При отсутствии клиники ребенок считается инфицированным в том случае, если AT к ВИЧ сохраняются после года. При получении положительного результата в ИФА необходимо трехкратно протестировать сыворотки, давшие однократно положительные результаты, и подтвердить положительный результат в независимой системе - иммунном блотинге

Обнаружение AT в реакции ИФА не дает достаточной информации, так как не говорито состоянии исследуемого, а свидетельствует лишь об инкубации, о болезни или о наличии бессимптомной инфекции. Иммунный блотинг дает большуюинформацию.таккакналичие AT ко многим антигенам ВИЧ характерно для выраженной болезни, в то время как реакция с 1-2 антигенами более характерна для слабовыраженного инфекционного процесса

Информативным является подсчет количества Т (хелперов) и соотношения Т4 к Те (супрессоров) лимфоцитов, определяемых с помощью моно-кпональных антител. Важным критерием заболевания может служить резкое увеличение количества иммуноглобулинов, особенно А и V. В общем клиническом анализе крови о заболевании может свидетельствовать лимфопения, лейкопения, эритропения, тромбоцитопения, эозинофилия.

Тесты на ВИЧ, используемые для эпидемиологического надзора, не должны обладать такой же точностью, какая требуется для клинических целей. Однако при очень низкой пораженности ВИЧ в популяции все положительные пробы необходимо исследовать повторно в дополнительных тестах.

Сбор крови для теста на антитела к ВИЧ или для скрининга может сопровождаться регистрацией фамилий обследуемых (поимененный сбор), либо производиться без регистрации фамилий или индивидуальной идентификационной информации (анонимный сбор) (табл. 2).

Для анонимного скрининга без учета идентификационной информации характерны следующие моменты: используются пробы крови, собранные для других целей; гарантируется анонимность благодаря тому, что идентификационные данные не собираются, либо не учитываются; не требуется получать согласия обследуемых; не требуется контакт с консультационными и социальными службами; наконец, что самое важное, сводятся к минимуму ошибки в статистических оценках, зависящие от уровня участия населения.

Хотя при анонимном исследовании на ВИЧ можно получить более точные данные, этот метод имеет следующие недостатки: он не может устранить потенциальное смещение оценки, обусловленное отбором; данные о связанном с высоким риском поведении и других важных переменных недоступны и не могут быть собраны ретроспективно; невозможно установить контакт с пораженными ВИЧ лицами, чтобы сообщить им об их состоянии; обследование можно проводить только в группах лиц, у которых кровь взята для других целей.

В районах, где распространенность ВИЧ-инфекций считается очень низкой, надзор за нею в рамках системы здравоохранения должен прежде всего быть направлен на отдельных лиц или группы населения, для которых характерно поведение, связанное с наибольшим риском заражения Повсеместно к ним относятся лица, имеющие большое число половых партнеров

Кровь для исследования на ВИЧ в такой группе риска легче всего брать в центрах, специализирующихся на лечении болезней, передаваемых половым путем, или подобных им учреждениях. Если распространено также внутривенное введение наркотиков, пробы крови следует брать у их потребителей в специальных учреждениях. Сбор крови один раз в 3 или 6 месяцев в группах наибольшего риска из географических районов, где таких групп больше всего, будет обычно достаточным. Исключение могут составить такие группы риска, как наркоманы, практикующие внутривенное введение препаратов, для которых могут потребоваться более частные обследования.

Сейчас ВОЗ занимается созданием системы классификации (стади-рования) заболевания для клинических исследований, которую можно также использовать в испытаниях методов лечения, что может иметь также прогностическую ценность. Однако такая система не призвана заменить существующие определения СПИДа, используемые при проведении надзора в системе здравоохранения.

В настоящее время повсеместно разрабатываются системы планового (рутинного) надзора за ВИЧ. Эти системы необходимо адаптировать к существующей эпидемиологической ситуации; так, методы составления выборок в популяциях с очень низкой распространенностью вируса должны обязательно отличаться от применяемых там, где распространенность умеренная или высокая.

Такой надзор предполагает рутинные обследования четко охарактеризованных и доступных групп населения. В него прежде всего следует включать те группы, которые подвергаются наибольшему риску заражения, и в каждой из этих групп необходимо отбирать постоянное заранее установленное число лиц для обследования.

В последние годы анонимный скрининг в наблюдаемых группах без учета идентифицикационных данных получает все большую распространенность как точный и экономически эффективный способ эпидемиологического надзора за ВИЧ-инфекцией в системе здравоохранения.

Рекомендации: Обследование на наличие вируса иммунодефицита человека (ВИЧ ) должно периодически проводиться у лиц, получающих лечение от заболеваний, распространяющихся половым путем, наркоманов, гомосексуалистов, бисексуалов и других лиц, принадлежащих к группам риска. Проверка на ВИЧ должна также предлагаться беременным женщинам и женщинам, предполагающим беременность, находящимся в группе риска по ВИЧ.

Тестирование на вич инфекцию не должно проводиться без согласия и без соответствующей консультации до теста и после него, врачи должны быть осторожны в использовании соответствующих тестов и лабораторий. Лица с позитивным серологическим результатом требуют соответствующей послетестовой консультации. Требуется немедленное установление половых партнеров. Лицам с негативным результатом анализа также требуется посттестовая консультация и повторное тестирование по назначению.

Установлено, что 1-1,5 миллиона человек в США инфицированы ВИЧ . За 10 лет развития ВИЧ приблизительно у 50% инфицированных развился синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), у остальных - другие клинические заболевания, связанные с ВИЧ-инфекцией. В настоящее время не существует лечения, которое может предотвратить летальный исход у больных СПИДом. При пред-лицензионном изучении АЗТ (азидотимидин, зидовудин) только половина пациентов прожила больше года после диагноза; более 5 лет прожило только 15%. Из 82 764 случаев, зарегистрированных ЦКЗ на конец 1988 года, 56% (более 46 000 пациентов) умерли, среди них более 80% лиц, чей диагноз был поставлен до 1985 года.

СПИД - единственное тяжелое заболевание в США, смертность от которого возрастает. Заболеваемость наиболее высока среди молодых людей (25-44 года), и при этом СПИД - одна из основных причин сокращения срока потенциальной продолжительности жизни. Между 1984 и 1987 годами СПИД перешел с 130-го на 7-е место среди основных причин сокращения срока потенциальной продолжительности жизни до 65 лет. СПИД - основная причина смерти среди наркоманов (IV) и больных гемофилией. Между открытием СПИДа в 1981 году и концом 1988 года было зарегистрировано 82 764 случая СПИДа. Прогнозируется, что к концу 1992 года будет зарегистрировано более 365 000 заболеваний и 260 000 человек умрут от СПИДа. В настоящее время на борьбу со СПИДом тратится в США 2,2 миллиарда долларов. Эти расходы должны возрасти до 12 миллиардов в 1992 году.

ВИЧ-инфекция в основном наблюдается у гомосексуалистов и бисексуалов, наркоманов и лиц с гетеросексуальными контактами с инфицированными. Остальные группы риска включают реципиентов при переливании крови, больных гемофелией, и детей, рожденных от инфицированных матерей. Серопозитивные результаты колеблются от 20 до 50% у гомосексуалистов и бисексуалов в зависимости от места жительства и от 5 до 50-65% среди наркоманов, живущих в таких городских агломерациях, как Нью-Йорк. Негры составляют 36% всех зарегистрированных случаев СПИДа и 16% - латиноамериканцы.

В зависимости от географического района количество рожающих женщин, инфицированных ВИЧ , колеблется от 0,02 до 3%. Существует информация, позволяющая предположить, что у беременных женщин, инфицированных ВИЧ, выше смертность от вирусных заболеваний и более высок риск развития СПИДа. Около 30-35% передают вирус своим детям. Три четверти случаев СПИДа у детей до 13 лет связаны с перенатальным заражением.

Эффективность скрининговых тестов на вич инфекцию.

Основным скрининговым тестом для определения антител к ВИЧ является ферментосвязывающий иммунный анализ (ELISA или EIA). ELISA имеет эффективность и чувствительность около 99%, когда прилагаемый набор компонентов используется в оптимальных лабораторных условиях. В обычной практике ложнопозитивные и ложно-негативные реакции появляются чаще. Ложно-негативные реакции обычно возникают из-за биологических причин в первые 6-12 недель после заражения, когда организм зараженных ВИЧ еще не успел выработать регистри руемое число антител. Ложно-позитивные реакции могут вы зываться специфическими серологическими реакциями отдельных лиц с иммунологическими заболеваниями или несколькими болезнями. Для сокращения вероятности ложноположительных реакций анализ с помощью реакции ELISA в серии последовательных тестов может иметь специфичность до 99,8%. Однако даже такая отличная чувствительность ведет к низким значениям заблаговременного распознавания положительной реакции на ВИЧ, когда обследование проводится в группе низкого риска заражения.

Показано, что трое из четырех лиц, имеющих положительную реакцию при повторяющемся тесте ELISA на вич инфекцию , имеют ложно-положительную реакцию, когда распространенность заболевания 30 на 100 000 (предполагается, что тест ELISA имеет чувствительность 98% и специфичность 99,8%).

Также необходимо подтверждать результаты ELISA проведением независимых тестов высокой специфичности на вич инфекцию (например, ««Западное пятно», радиоимунные методы анализа, и непрямые иммунофлюоресцентные методы). «Западное пятно» наиболее распространенный из этих тестов в США.

Поставленные в соответствии со стандартами последовательные тесты ELISA на вич инфекцию с завершающим их тестом ««Западное пятно» имеют уровень ложно-положительных реакций менее, чем 0,001%. Важная проблема состоит в том, что многие лаборатории не используют стандартизованных методов по работе с тестом «Западное пятно», так как точность теста сильно зависит от выбора химических реагентов, квалификации технического персонала и методов анализа результатов, лаборатории, в которых отсутствует должный контроль качества выдают больше ложно-положительных и ложно-отрицательных результатов, чем наблюдается в случае соблюдения оптимальных условий.

Кроме того, некоторые неявные сочетания вирус-специфичных групп белков могут вызвать положительный результат на вич инфекцию при применении теста «Западное пятно». Может также возникнуть необходимость в коррекции ложно-положительных результатов ELISA в случаях, когда «Западное пятно» не дает определенного результата. Это случается в 15-20% тестов, ставящихся в группах низкого риска. Если лицо не заражено, то «Западное пятно» может не давать результатов в течение нескольких месяцев. Использование в будущем вирусных культур может создать третий этап диагностических тестов для сокращения риска диагностической ошибки.

- Вернуться в оглавление раздела " "

Распространенным методом диагностики сегодня является скрининг. ВИЧ этим способом легко выявить даже на ранних стадиях. С помощью такого исследования удается определить наличие в крови пациента антител к этому опасному заболеванию. Какая скрининговая диагностика ВИЧ применяется в современной медицине и что нужно знать о ней?

Скрининговый метод диагностики ВИЧ-инфекции: описание

На сегодняшний день для скринингового исследования применяют спектр различных реагентов, с помощью которых удается диагностировать вирус иммунодефицита. Еще несколько лет назад для этого использовались ферменты третьего поколения. Их эффективность и чувствительность были недостаточно высокими. Реагенты четвертого поколения, применяемые сейчас, показывают лучшие результаты. С их помощью удается выявить ат и аг к ВИЧ 1, 2 (скрининг производится в лабораторных условиях). Основное преимущество исследования такого типа заключается в возможности выявления не только антител, но и антигенов. Это позволяет специалистам в области медицины определить, каким типом вируса иммунодефицита заражен человек. С помощью такого скрининга на ВИЧ-инфекцию также удается выявить носителей вируса, у которых он не проявляется, но может передаваться другим людям.

Самое распространенное исследование, которое используется для выявления данного недуга в государственных и частных учреждениях - ИФА тест. Проводить его рекомендуется спустя три - четыре недели после инфицирования. Речь идет о незащищенных контактах с новым партнером, переливании крови и так далее.

Что еще следует знать о скрининговых исследованиях на ВИЧ?

Важно знать, что такое исследование производится посредством добавления крови пациента на индикатор со специальными реагентами. Забор крови осуществляются натощак. С момента последнего приема пищи до проведения тестирования должно пройти не менее восьми часов.

Скрининговый тест в диагностике ВИЧ-инфекции играет немаловажную роль. С его помощью можно определить наличие или отсутствие вируса иммунодефицита на ранних сроках.

Результаты такого исследования могут быть положительными, отрицательными и сомнительными. Последние бывают крайне редко. Сомнительный результат говорит о неправильном проведении процедуры или некачественных реагентах. В случае положительного результата проводится дополнительное исследование. Речь идет об иммунном блоттинге. Отрицательный результат подтверждения не требует.

Диагноз инфекции ВИЧ может быть установлен в лаборатории посредством выявления специфических антител к вирусу. При многих других вирусных заболеваниях наличие антител свидетельствует о перенесенной в прошлом инфекции. Однако, так как при заражении ВИЧ развивается хроническая инфекция, серопозитивные лица являются не только активно инфицированными, но также и заразными.

Серологический тест для определения наличия антител к ВИЧ стал широкодоступным в 1985 г. Наиболее часто применяемым методом является связанный с ферментом иммуносорбентный анализ (ELISA), однако в настоящее время разрабатываются другие типы проверок на наличие антител, такие, как тесты, основанные на агглютинации частиц и «dot» ELISA. Тесты можно выполнить быстро и просто, они не нуждаются в сложном оборудовании.

Хотя вышеупомянутые тесты в высокой степени чувствительны, они могут давать и ложные результаты, а положительный результат нуждается в дальнейшем подтверждении с помощью дополнительного теста, такого, как иммуноблоттинг (вестерн-блот) или непрямая иммунофлуоресценция.

Также возможно непосредственное определение антигенов ВИЧ (вируса или вирусного белка) в сперме; промышленность выпускает необходимые наборы реактивов. Эти анализы были первоначально разработаны как попытка получить лабораторный показатель наличия инфекции в период «окна» между заражением и образованием антител, которое обычно продолжается от 4 до 16 нед. Анализы для выявления антигенов в настоящее время используются более широко для контроля за результатами противовирусного лечения больных СПИДом.

Программы скрининга на наличие инфекции ВИЧ (т. е. обследование всего населения, или отдельных групп населения с целью определения инфицированности или наличия заболевания) могут помочь:

  • предупредить передачу вируса через кровь и продукты крови, сперму, ткани или органы для пересадки;
  • получить эпидемиологическую информацию о распространенности и частоте заболеваемости ВИЧ.

Каждый раз, когда обсуждается программа скрининга, следует точно формулировать и решать все вопросы, отмеченные в заявлении ВОЗ (Приложение 4). Плохо разработанные и плохо осуществленные программы могут нанести ущерб общественному здоровью и привести к потере ресурсов. Удовлетворение потребностей общественного здравоохранения и соблюдение прав человека обеспечиваются наилучшим образом при тщательном рассмотрении целого ряда вопросов, связанных с технологией и материально-техническим снабжением, а также социальных, правовых и этических проблем до того, как будет принято решение о продолжении скрининговой программы.

Обязательному скринингу на ВИЧ отводится весьма ограниченная роль в программах профилактики и борьбы со СПИДом.

Рутинный скрининг доноров помогает предотвратить передачу ВИЧ с кровью, спермой или с другими клетками, тканями и органами. Частью такого скрининга являются согласие индивида, основанное на информации, и проведение консультаций, при которых должна быть обеспечена конфиденциальность.

Выявление серопозитивных лиц с помощью обследования позволяет определить эпидемиологический тип ВИЧ, что необходимо для оценки районов и групп населения, нуждающихся в особых программах просвещения или других профилактических службах. Эти обследования следует проводить с использованием методов, не угрожающих соблюдению прав человека. Их следует осуществлять во время консультации либо получив согласие от информированного индивида, соблюдая при этом конфиденциальность, либо анонимным, свободным образом (без регистрации других данных, позволяющих установить личность).

Добровольные проверки на СПИД могут стать частью медико-сани-тарной помощи при подозрении на заболевания, связанные с ВИЧ, а также могут быть осуществлены в комплексе с информированием, просвещением, консультированием и другими поддерживающими службами и призваны содействовать устойчивым изменениям поведения. При добровольных проверках на ВИЧ очень важны получение согласия от информированного индивида и возможность консультирования при условии сохранения конфиденциальности. Частью программ предупреждения СПИДа и борьбы с ним должны стать широкодоступные службы добровольных проверок на ВИЧ, причем следует облегчить доступ к таким службам.



Разделы